Las
semillas de I. verum L. “anís estrella” fueron adquiridas en el mercado
Modelo de la provincia de Chiclayo, Departamento de Lambayeque Una vez
recolectadas se seleccionaron las mejores semillas, y se lavaron con agua y una solución de hipoclorito
de sodio para evitar la contaminación bacteriana y fúngica. Luego se
secaron
en
una estufa a 40 °C durante dos días hasta eliminar el solvente; de allí se
guardaron en papel periódico y en bolsas de papel oscuro. Las semillas se
molieron en
un mortero para lograr una mejor homogenización y conservación. Se pesó 10 g
del polvo fino y seco en una balanza analítica y se sometió a un infuso de agua
a 94 °C y se dejó enfriar; quedando así lista para el tratamiento con las
ratas.
Se emplearon 40
ratas machos de la especie Rattus rattus var. albinus, de 4 meses de
edad y 270 g ± 20 g de peso medio, adquiridos del bioterio de la Facultad de
Medicina de la Universidad Nacional de Trujillo. Los mamíferos fueron aclimatados
por 07 días a una temperatura de 21 a 23 °C, luego repartidos en 4 grupos de 10
roedores cada uno, otorgándoles agua y comida a libertad (crecimiento). Al día
ocho los animales ayunaron por 24 horas, y antes de ministrarles el extracto
hidroalcohólico del anís estrella, se les pesó y señaló un título, luego se
anotó en la ficha de recolección de datos (Beltrán, 2015; Gonzales et al., 2020).
Se aplicaron los tratamientos durante 72 horas consecutivas usando una sonda
orogástrica con una cánula metálica, consistentes en una dosis del extracto y
una concentración de ranitidina (Herrera et al., 2015). que fue contrastado
con los conjuntos testigo y control, basados en la descripción de los
siguientes grupos:
Provocación de
lesiones ulcerosas por consumo de etanol de 96° (Marhuenda, 2005).
Conjunto I: testigo al que solo se administró suero fisiológico (SSF 0,9%).
Conjunto II:
grupo control que se concedió una dosis de suero fisiológico (SSF) y una hora
después fueron estimulados con etanol absoluto.
Conjunto III:
una dosis de 500 ml/kg del extracto de anís estrella después de una hora se
aplicó una dosis de etanol absoluto.
Conjunto IV:
una dosis de ranitidina (50 mg/kg) después de una hora se les ministró una
dosis de etanol.
Se trabajaron
con 5 grupos de 10 animales cada uno. Siete horas más tarde de haber inducido la
lesión gástrica con etanol 96°, los roedores fueron anestesiados con
pentobarbital sódico (50 mg/kg de peso, vía intraperitoneal) y se ejecutó una
laparotomía, seguido de una gastrectomía. Se cortó por la curvatura mayor del
estómago para la estimación de los daños ulcerosos. El vaciado gástrico se
eliminó y se lavó con suero fisiológico (SSF 0,9%). Se estabilizaron los
estómagos en vasos beaker con suero fisiológico frío hasta su verificación
visual. Se amplió el estómago en una plancha de corcho blanco, asegurándose con
alfileres. Se llevó al microscopio estereoscópico para la determinación del
número y tamaño de lesiones de la mucosa gástrica experimental percibiéndose
las visualizaciones macroscópicas y microscópicas de las cavidades gástricas de
los animales.
Las biopsias
obtenidas fueron puestas en formal-dehido neutro al 10% y luego se enviaron en
frascos titulados con la serie de cada roedor al laboratorio de anatomía
histopatológica de la ciudad de Trujillo. Las mejores láminas se colorearon con
hematoxilina/eosina. Luego se procedió al análisis histopatológico.
El nivel o
grado de ulceración (NU) se expresó como el total de milímetros cuadrados (mm2)
tabulados considerándose el largo y el ancho de cada injuria. El producto final
de cada conjunto de ratas se formuló en tanto por ciento de inhibición respecto
al nivel de ulceración del grupo control, detallándose así:
N.U.c: Nivel de
ulceración medio del grupo control.
N.U.p: Nivel de
ulceración medio del grupo problema o patrón.
Análisis
Estadístico: Se aplicó el test T-Student, donde se aceptó un valor
significativo de p < 0,05. Se usó programa estadístico SSPS versión 21,0. Para la comparación de grupos se empleó la
prueba no paramétrica de Kruskall Wallis.
El producto final de este
análisis coincide también con el estudio desarrollado por Mureithi et al.
(2020) quienes encontraron porcentajes de inhibición de úlceras gástricas de 76,37%, 72,51% y 63,30% en
tres genotipos de Solanum nigrum (SLN), “solanácea africana”. Los
componentes activos del I. verum L. como el anetol, taninos, flavonoides, azúcares, ácidos y
fenoles estarían involucrados en la citoprotección de la dolencia las cuales estimularían a las células
epiteliales del estómago para que sinteticen abundante mucus, bicarbonato y
fosfolípidos y de esta manera prote-gerían a la cavidad digestiva contra la
actividad agresiva del etanol (Fernández, 2014; Rodríguez & Santa
María, 2017; Herencia et al., 2018).
La injuria gástrica
producida por etanol (grupo control) a la mucosa digestiva de los roedores (figura
2) produjo deterioro y erosión de la misma, estimuló la actividad oxidativa de
los radicales libres (por un daño a la mucosa), la lipoper-oxidación, el trastorno
del ADN y la disminución de concentración de glutatión en la mucosa gástrica de
rata (Pérez, 2018). El perjuicio gástrico exhibiría un crecimiento de las
citoquinas proinflamatorias las que se ocuparían de detener las acciones de dos
enzimas antioxidantes (la superóxido dismutasa y el glutatión peroxidasa)
incrementándose la oxidación y la inflamación cualidades inherentes de la
gastritis y de la forma-ción ulcerosa en la cavidad gástrica (Fernández, 2014;
Castillo et al., 2016; Pareja et al., 2017).
Figura 2. Mucosa del estómago de ratas con etanol exhibiendo
ulceraciones hemorrágicas.
En relación con el grosor
anormal de la cavidad gástrica (Tabla 2) de 20 animales ensayados únicamente 4
de ellos expusieron esta cualidad anormal constatándose que donde se aplicó la
dosis del extracto (Alexis & Zurita, 2017) de anís hubo menos ratas con
daño (Figura 3). Estos resultados coinciden con lo encontrado por Delgado
(2015) quien administró ranitidina a un grupo de ratas obteniendo un 75,51 % de
inhibición del daño ulceroso, sin embargo, cuando se administrò la ranitidina (conjunto
IV) a las ratas se halló una leve necrosis hemorrágica con inflamación epitelial
(Figura 4). Luego adminis-trando a las ratas una dosis de 1000 mg/kg del
extracto liofilizado de Capsicum annum L. halló una reducción ulcerosa
de 81,63% coincidiendo estos resultados con lo descubierto por Gonzales et al.
(2021) quien concedió tres dosis de Aloe vera L. “sábila” en ratas con
úlceras inducidas por indometacina encontró una reducción ulcerosa de 86,7%. Además,
concuerda con nuestros resulta-dos al haber proveído una dosis de 500 mg/kg de I. verum L. “anís estrella” a los
roedores hubo una disminución de la injuria de 79,9%. El mecanismo de secreción
del ácido había podido ser inhibido, hasta entonces, de forma parcial. Existen
3 tipos de receptores en la membrana basolateral de las células parietales:
gastrina, acetilcolina e histamina, lo que justificaba los mecanismos de acción
de los anticolinérgicos y AR-H2. La ranitidina actuaría bloqueando los
receptores AR-H2 en la membrana basolateral de las células parietales lo que
inhibiría a la histamina a estimular la secreción de HCl evitándose el
deterioro de la mucosa gástrica (Lascano et al., 2019).
Figura 3. Mucosa estomacal de rata con anís estrella
más etanol, demostrando ausencia de áreas hemorrá-gicas y exigua necrosis de la
mucosa.
Figura
4.
Mucosa eupéptica con ranitidina más etanol (conjunto IV) exhibiendo una leve
necrosis hemorrágica con inflamación epitelial.
En la Tabla 3 se observa
que el 90% de las ratas analizadas del conjunto II (control) exhibió úlceras de
nivel muy severo resaltadas con evidentes erosiones sanguinolentas (Figura 1),
así como el 10% mostró un grado severo. En cambio, el conjunto III al cual se
le administró una dosis de anís estrella mostró lesiones leves (70%), moderadas
(20%) y severas (10%).
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